因此

1、therefore adv.因此, 所以=for that reason=consequently常用於連接兩個並列分句，其前加“and”或分號“；”。

He was ill, and therefore could not come. 他病了, 所以未​​能來。
He has broken his leg and therefore he can't walk.他摔壞了腿，因此不能走路了。
We do not have enough money. Therefore we cannot afford to buy the new car.我們的錢不夠,因此買不成這輛新車。
2、so conj. adv因而, 所以, 結果是

It was late, so we went home. 天晚了, 所以我們就回家去了。
He was sick, so they were quiet.他病了，所以他們很安靜。
3、hence adv.因此, 從此

The town was built among the hills, hence the name Hilltown. 該城鎮修建在群山之中,故取名'山城'。
It is very late; hence you must go to bed.時間已經很晚了，因此你必須睡覺去。（記住前面是分號，而不是逗號）
4、then adv因此，就

Go into the cave, then they won't see you. 躲進洞裡去，那他們就看不到你了。

5、accordingly adv.因此, 從而；所以，因此結果；因此（偶作連詞使用conj.）

He was asked to leave the city and accordingly he went.有人叫他離開該城市,所以他就走了。
You may arrange accordingly.你可以權宜處理。
Mr Foster has never been to China. Consequently / Hence he knows very little about it.福斯特先生從未去過中國,所以對中國了解得很少。
My car was broken down and consequently I was late. = in consequence
6、Thus adv.如此，像這樣；因此；於是

He sold his farm and thus he had enough money for his journey.他賣掉了農場，這樣他就有足夠的錢旅行了。
There has been no rain — thus, the crops are drying.天沒下雨，因此莊稼要枯死了。

p53 腫瘤抑制基因

p53為腫瘤抑制蛋白（也稱為p53蛋白或p53腫瘤蛋白），屬於最早發現的腫瘤抑制基因（或抑癌基因）之一。 p53蛋白能調節細胞週期和避免細胞癌變發生。 因此，p53蛋白被稱為基因組守護者。 總而言之，其角色為保持基因組的穩定性，避免突變發生。
功能

p53蛋白在避免癌症發生機制上扮演重要的角色，例如，細胞凋亡 (apoptosis) 、基因組穩定性 (genetic stability) 、抑制血管新生 (angiogenesis)。 p53蛋白通過下列之機構達成避免癌症發生:

當DNA受損時，p53蛋白能活化DNA修復蛋白 (DNA repair proteins)。
p53蛋白能抑制細胞生長週期停留於G1/S的節律點上，以達成DNA損壞辨識。
(若能將細胞於此節律點上停留夠久，DNA修護蛋白將有更充裕的時間修復DNA損壞部位，並繼續細胞的生長週期。)
若細胞的DNA受損已不能修復，p53蛋白能起始細胞凋亡程序，避免擁有不正常遺傳資訊的細胞繼續分裂生長。

活化的p53蛋白能接合於DNA，促使多個基因表現，包括基因WAF1/CIP1，其為p21蛋白之編碼基因。
p21接合於[[G1-S/CDK (CDK2)]] 和S/CDK複合體 (此蛋白在G1/S細胞週期節律點上有重要功能) 以抑制該複合體的活性。
當p21蛋白與CDK2形成複合體時，細胞將無法進入到細胞分裂的階段。(p21扮演細胞分裂剎車的角色)
而突變後的p53蛋白將可能喪失與DNA形成有效結合的能力，造成p21蛋白將無法形成，細胞分裂就會持續進行，無法停止。 因此，受損細胞將不受控制的進行細胞分裂，最終形成腫瘤。 根據最近的研究，p53蛋白與RB1程序經由p14ARF蛋白相互調節的可能性更加提高。

調節

p53蛋白藉由許多不同的壓力形式而激發其活性，其中包括但不僅僅侷限於DNA損傷 (包括 UV, IR或化學物質如過氧化氫 (hydrogen peroxide)所造成的損傷)，氧化壓力 (oxidative stress)，滲透壓力 (osmotic stress)，核糖核苷酸缺乏 (nucleotide depletion) 和喪失調節癌基因表現能力。這些活性激發可由兩個主要的事件得出。首先，在受到壓力的細胞中，p53蛋白的半衰期 (half-life) 會突然的增加，造成p53蛋白在細胞中的累積。再來則是構型變化 (conformational change) 使得p53蛋白被激發成為轉錄調節因子 (transcription regulator)。

10x PBS

To make 10X PBS Buffer, dissolve the following reagents in 800 ml ultrapure water.

NaCl 80 g
KCl 2 g
Na2HPO4 14.4 g
KH2PO4 2.4 g


Adjust pH of PBS Buffer Solution to 7.4 with HCl.
Bring volume to 1 liter, autoclave or sterilize by filtration.

Molecular Cloning 
1X PBS (10 mM)
8 g NaCl 
0.2 g KCl 
1.44 g Na₂HPO₄ 
0.24 g KH₂PO₄ 

in 800 ml of distilled H₂O. 

Adjust the pH to 7.4 with HCl. Add H₂O to 1 liter. Sterilize by autoclave. 

10X PBS 

1. Dissolve the following in 800ml distilled H₂O.
   • 80g of NaCl
   • 2.0g of KCl
   • 14.4g of Na₂HPO₄
   • 2.4g of KH₂PO₄

1. Adjust pH to 7.4.
2. Adjust volume to 1L with additional distilled H₂O.
3. Sterilize by autoclaving.

Molarity of 1X PBS is 10mM. To prepare 20mM PBS take 16g of NaCl, 0.4 g KCl, 2.88 g Na2HPO4 0.48 g KH2PO4 in 800 ml of distilled H2O. Adjust the pH to 7.4 with HCl. Add H2O to 1 liter.

流式細胞儀Flow cyotmetry

使用流式細胞儀注意事項


1. 調整完條件後，每一個試驗組可以先試跑條件，確定都在相同的區域下，再開始收數據
2. 細胞經由Alcohol固定之後，會變得很黏，所以要直接先用冰酒精(4度C)打散，以免之後黏成一團，無法進行實驗
3.

Real time PCR

絕對定量

相對定量

Melting curve & Tm

Ct